Vergleich der sekretorischen Mitglieder der murinen DNase1 Proteinfamilie nach Expression in \(\textit {Pichia pastoris}\)
- Die sekretorischen Mitglieder der DNase1 Proteinfamilie, DNase1, DNase1-like2 (DNase1L2) und DNase1-like3 (DNase1L3), wurden erfolgreich rekombinant in \(\textit {Pichia pastoris}\) exprimiert und anschließend durch Kombination chromatografischer Verfahren isoliert. Durch Anpassung der Kulturbedingungen konnte die Ausbeute und Prozessierung der Proteine optimiert werden. Die enzymatisch-biochemischen Untersuchungen erbrachten erstmals quantifizierbare und vergleichbare Daten bezüglich der Aktivität der Endonukleasen unter Einfluss verschiedener Ionenbedingungen und pH-Werte. Demnach hat DNase1 unter den vorherrschenden physiologischen Bedingungen die höchste Aktivität beim Verdau von proteinfreier DNA. Währenddessen wird Chromatin von allen drei Nukleasen ähnlich effizient abgebaut. Die DNase1L2 nimmt hinsichtlich vieler Gesichtspunkte (Aktivitätsprofil, Substratspezifität, Heparin- und Aktin-Interaktion und Glykosylierung) eine intermediäre Stellung zwischen DNase1 und DNase1L3 ein.
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| Author: | Lukas VerhülsdonkORCiDGND |
|---|---|
| URN: | urn:nbn:de:hbz:294-96079 |
| DOI: | https://doi.org/10.13154/294-9607 |
| Referee: | Hans Georg MannherzGND, Ralf ErdmannORCiDGND |
| Document Type: | Doctoral Thesis |
| Language: | German |
| Date of Publication (online): | 2023/01/24 |
| Date of first Publication: | 2023/01/24 |
| Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
| Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Medizinische Fakultät |
| Date of final exam: | 2022/12/13 |
| Creating Corporation: | Medizinische Fakultät |
| GND-Keyword: | Desoxyribonucleasen; Pichia pastoris; Rekombinantes Protein; Chromatographie; Enzym |
| Institutes/Facilities: | Institut für Anatomie, Abteilung für Anatomie und Molekulare Embryologie |
| Dewey Decimal Classification: | Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften / Medizin, Gesundheit |
| faculties: | Medizinische Fakultät |
| Licence (German): |  Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |
