Expression of constructs of WT-\(\alpha\)-cardiac actin and its mutants in different cell lines and primary rat cardiac myocytes

  • Das Ziel dieser Arbeit war Untersuchung von Mutationen des kardialen \(\alpha\)-Aktins, die in manchen Fällen der hypertrophen Kardiomyopathie (HCM) gefunden wurden. Mit Konstrukten, die N-terminal einen GFP- (grün fluoreszierte Protein) oder einen Hemagglutinin tag erzeugten, wurden Wildtyp (WT) und die zwei Mutanten - Y166C und M305L - des kardialen \(\alpha\)-Aktins zunächst fibroblastische NIH3T3, Kardiomyozyten ähnliche HL-1 und humane A431 (epidermoide Tumor-) Zellen transfiziert. Die Ergebnisse dieser Untersuchungen waren widersprüchlich. Die Y166C-Mutante mit GFP konnte intrazellulär nicht polymerisieren, jedoch mit dem HA-tag war diese Mutante fähig zu polymerisieren. Um primäre Cardiomyocyten zu transfizieren wurden zwei rekombinante adenovirale Konstrukte (WT und Y166C) hergestellt. In Herzmuskelzellen konnten WT und die Y166C-Mutante sehr gut polymerisieren und sich in sarkomerische Strukturen einbauen. Jedoch erzeugte die Y166C Mutante kürzere Sarkomere im Vergleich zu WT-kardialem \(\alpha\)-Aktin.

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Metadaten
Author:Antonina Joanna MazurORCiDGND
URN:urn:nbn:de:hbz:294-23178
Referee:Hans Georg MannherzGND, Christian HerrmannORCiDGND
Document Type:Doctoral Thesis
Language:English
Date of Publication (online):2008/08/27
Date of first Publication:2008/08/27
Publishing Institution:Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie
Date of final exam:2008/07/04
Creating Corporation:Fakultät für Chemie und Biochemie
GND-Keyword:Actin; Mutante; Sarkomer; Hypertrophische Herzmuskelkrankheit; Herzmuskelzelle
Dewey Decimal Classification:Naturwissenschaften und Mathematik / Chemie, Kristallographie, Mineralogie
faculties:Fakultät für Chemie und Biochemie
Licence (German):License LogoKeine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht

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