Einsatz des Tandem-Affinity-Purification-Verfahrens zum Nachweis von Keratin 23 Interaktionspartnern in Abhängigkeit vom N-terminal bzw C-terminal getaggten Zytokeratin 23

In Vorarbeiten wurden mittels einer TAP neue Interaktionspartner für das Keratin 23 identifiziert. In der Arbeit wurde ein C-terminal getaggtes TAP-Konstrukt kloniert. Hierbei wurden C-terminal die Sequenzen für die Tag-Proteine an das Köderprotein Keratin 23 angehängt, das Konstrukt retroviral in Zellen transduziert, diese kultiviert, lysiert und die Zellproteine mittels schonender TAP aufgereinigt und die Interaktionspartner dargestellt. Sowohl in der C-terminal- als auch N-terminal-getagten Tandem-Affinity-Purification wurden dieselben Interaktionspartner identifiziert. Zusammenfassend belegen die Daten der Analyse, dass im Falle des Keratin 23 die Tag-Richtung in der Tandem-Affinitäts-Reinigung im Hinblick auf die identifizierbaren Interaktionspartner keine Rolle spielt und bestätigen in einem unabhängigen Versuch die von Liffers et al. nachgewiesenen Keratin 23 Interaktionspartner.

Metadaten
Author:	Norbert Nosal ORCiD GND
URN:	urn:nbn:de:hbz:294-41167
Referee:	Stephan Hahn ORCiD GND, Joachim Rassow ORCiD GND
Document Type:	Doctoral Thesis
Language:	German
Date of Publication (online):	2014/07/08
Date of first Publication:	2014/07/08
Publishing Institution:	Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:	Ruhr-Universität Bochum, Medizinische Fakultät
Date of final exam:	2014/05/13
Creating Corporation:	Medizinische Fakultät
GND-Keyword:	Cytokeratine; Proteinbindung; Colonkrebs; Silberfärbung; Transduktion
Institutes/Facilities:	Medizinische Fakultät, Abteilung für Molekulare Gastroenterologische Onkologie
Dewey Decimal Classification:	Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften / Medizin, Gesundheit
faculties:	Medizinische Fakultät
Licence (German):	Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht

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