Biochemische Untersuchungen zur Aktivität von P-TEFb
- Der positive Transkriptionselongationsfaktor b (P-TEFb) aus der Cyclin-abhängigen Kinase 9 (Cdk9) und CyclinT wird durch das regulatorische Protein Tat von HIV1 in die Promotorregion des integrierten viralen Genoms rekrutiert. Dort vermittelt P-TEFb eine Transkriptionssteigerung durch Phosphorylierung der RNA-Polymerase II. Im Rahmen dieser Arbeit wurde untersucht, ob die Kinaseaktivität von Cdk9 durch ein Fusionsprotein aus dem viralen Protein Tat und einer Domäne des Proteins p27Kip1 beeinflusst wird. Das Fusionsprotein wurde bakteriell exprimiert und mittels Affinitätschromatographie aufgereinigt. Mittels Isothermer Titrationskalorimetrie konnte für TatKip eine Bindung an Cyclin T1 gezeigt werden, eine signifikante Reduktion der Kinaseaktivität von Cdk9 konnte im radioaktiven Filterbadassay jedoch nicht detektiert werden. Ein weiteres Projekt dieser Arbeit beinhaltet den Aufbau eines FRET basierten Kinaseassays zur Aktivität von P-TEFb.
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| Author: | Florian KraftGND |
|---|---|
| URN: | urn:nbn:de:hbz:294-37729 |
| Referee: | Roger S. GoodyGND, Joachim RassowORCiDGND |
| Document Type: | Doctoral Thesis |
| Language: | German |
| Date of Publication (online): | 2013/06/13 |
| Date of first Publication: | 2013/06/13 |
| Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
| Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Medizinische Fakultät |
| Date of final exam: | 2013/04/18 |
| Creating Corporation: | Medizinische Fakultät |
| GND-Keyword: | Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer; HIV; Transkription (Genetik); Cyclin-abhängige Kinasen; Biochemische Analyse |
| Institutes/Facilities: | Institut für Physiologische Chemie, Abteilung Biochemie supramolekularer Systeme |
| Dewey Decimal Classification: | Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften / Medizin, Gesundheit |
| faculties: | Medizinische Fakultät |
| Licence (German): |  Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |
