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Mykhaylo O. Debelyy

• It was shown that Lpx1p is present in the peroxisome but Ldh1p is predominantly localized to lipid droplets. While Lpx1p was shown to be a peroxisomal enzyme, subcellular localization studies revealed that Ldh1p is predominantly localized to lipid droplets. Triacylglycerol lipase as well as hydrolase activities were shown for both recombinant proteins Lpx1p and Ldh1p \(\textit {in vitro}\). It was shown that the Lpx1p protein is not required for wild-type-like steady-state function of peroxisomes, which might be indicative of a metabolic rather than a biogenetic role. It was clearly shown that peroxisomes in \(\Delta\)\(\it {lpx1}\) mutants have an aberrant morphology characterized by intraperoxisomal vesicles or invaginations. Ldh1p is not required for the function and biogenesis of peroxisomes. Ldh1p is required for the maintenance of a steady-state level of the nonpolar and polar lipids of lipid droplets. It was shown in this work that the AAA-complex contains Pex5p dislocase as well as deubiquitinating activity.
• Es konnte gezeigt werden, dass Lpx1p in Peroxisomen lokalisiert ist, wo hingegen Ldh1p überwiegend zu Lipid-Droplets dirigiert wird. Während gezeigt werden konnte, das es sich bei Lpx1p um ein peroxisomales Enzym handelt, wurde anhand subzellulärer Lokalisationsstudien für Ldh1p eine überwiegende Lokalisation an Lipid-Droplets dargelegt. Für Lpx1p und Ldh1p konnte \(\textit {in vitro}\) mittels rekombinanter Proteine eine Triacylglycerol-Lipase wie auch-hydrolase Aktivität belegt werden. Lpx1p ist am peroxisomalen Stoffwechsel beteiligt. Basierend auf den Daten wird eine Funktion von Ldh1p in der Aufrechterhaltung der Lipid-Homeostase in der Hefe durch die Regulation des Spiegels an Phospholipiden wie auch nicht-polaren Lipiden diskutiert. In der vorliegenden Arbeit konnte gezeigt werden, dass der AAA-Komplex sowohl die Pex5p-Dislokaseaktivität wie auch eine deubiquitinilierende Aktivität beinhaltet.