FTIR-spektroskopische Untersuchungen kleiner GTPasen
FTIR-spectroscopic investigations of small GTPases
- In dieser Arbeit wurden die GTPasen Ran und Rap1b hinsichtlich ihres Reaktionsmechanismus mit Hilfe der trFTIR-Spektroskopie untersucht. Es wurde gefunden, dass Tyrosin 39 bei Ran das angreifende Wasser falsch positioniert. Fehlt Tyrosin 39, wird die intrinsische Hydrolyse beschleunigt; bei der GAP-katalysierten Hydrolyse hat Tyrosin 39 keine Bedeutung. Die Bande von Tyrosin 39 konnte durch Mutationsstudien und Isotopenmarkierung mittels trFTIR identifiziert und der zeitliche Ablauf während der Hydrolyse zugeordnet werden. Es wurden \(^{13}\)C\(^{15}\)N-markierte Aminosäuren mittels auxotropher \(\textit {E. coli}\)-Stämme in M9-Medium in die Proteine eingebaut. Zunächst wurden isolierte Aminosäuren und die von deren Seitenketten abgeleiteten Moleküle IR-spektroskopisch analysiert. Die Technik der Isotopenmarkierung konnte von \(\textit {E. coli}\) auf \(\textit {R. spheroides}\) übertragen werden. Bei Rap1b wurde der Einfluss des "Asparagindaumens" während der \(\it {"off"}\) nach \(\it {"on"}\) Reaktion aufgeklärt.
Author: | Sven BruckerGND |
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URN: | urn:nbn:de:hbz:294-25111 |
Referee: | Klaus GerwertORCiDGND, Helmut E. MeyerGND |
Document Type: | Doctoral Thesis |
Language: | German |
Date of Publication (online): | 2009/04/07 |
Date of first Publication: | 2009/04/07 |
Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Biologie und Biotechnologie |
Date of final exam: | 2008/12/19 |
Creating Corporation: | Fakultät für Biologie und Biotechnologie |
GND-Keyword: | GTP-Bindende Proteine; Ras-Proteine; FT-IR-Spektroskopie; Isotop / Isotopenmarkierung; Proteintransport |
Institutes/Facilities: | Lehrstuhl für Biophysik |
Dewey Decimal Classification: | Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie |
faculties: | Fakultät für Biologie und Biotechnologie |
Licence (German): | Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |